Micro December 2018

(Português) PT

Descarte Após serem utilizadas, as Placas 3M Petrifilm REC podem conter micro-organismos representando um possível risco biológico. Siga as normas atuais do setor e os regulamentos locais para o descarte de resíduos com risco biológico. Instruções de uso Siga todas as instruções com atenção. Caso contrário, pode haver resultados imprecisos. Preparo da amostra 1. Use diluentes estéreis adequados: Água de diluição fosfato de Butterfield tamponada, água peptonada a 0,1%, diluente de sal peptonado (Diluente de Recuperação Máxima) água peptonada tamponada, solução salina (0,85%– 0,90%), solução salina tamponada com fosfato (PBS), água destilada ou caldo Letheen sem bissulfito. Não utilize diluentes que contenham citrato, bissulfito ou tiossulfato com as Placas 3M Petrifilm REC; eles podem inibir o crescimento. Se o tampão de citrato for indicado no procedimento padrão, substitua por água de diluição tamponada de fosfato de Butterfield, aquecida a 40 - 45°C. 2. Misture ou homogeneíze a amostra. 3. Para o crescimento ideal e recuperação de microrganismos em produtos ácidos (< pH 5), ajuste o pH da suspensão da amostra para um pH maior que pH 5. Para produtos ácidos, ajuste o pH com 1N NaOH. Plaqueamento 1. Coloque a Placa 3M Petrifilm REC sobre uma superfície nivelada e plana. 2. Levante a película superior e, com a pipeta perpendicular à área de inoculação, despeje 1 mL da suspensão da amostra no centro da película inferior. 3. Role o filme superior para baixo para a amostra, para evitar o aprisionamento de bolhas de ar. 4. Coloque o Difusor 3M™ Petrifilm™ Plano (6425) com o lado plano para baixo no centro da placa. Pressione delicadamente o centro do difusor para distribuir a amostra uniformemente. Espalhe o inóculo sobre toda a área de crescimento da Placa 3M Petrifilm REC antes que o gel se forme. Não deslize o difusor sobre o filme. 5. Remova o Difusor 3M Petrifilm Plano e deixe a placa parada por pelo menos umminuto para permitir a formação do gel. Incubação Incube as Placas 3M Petrifilm REC em posição horizontal, com a superfície limpa voltada para cima, em pilhas de até 20 placas. Diversos tempos e temperaturas de incubação podem ser usadas dependendo dos métodos locais de referência atuais. Incube as Placas 3M Petrifilm REC por 18 a 24 horas a 32°C (produtos lácteos), 35°C ou 42°C. Interpretação 1. As Placas 3M Petrifilm REC podem ser contadas usando um contador de colônias padrão ou qualquer outro amplificador iluminado. Não conte as colônias presentes na espuma, pois elas não estão sob a ação dos agentes de seletividade do meio. Não conte artefatos de bolhas que possam estar presentes. 2. A interpretação das colônias de E. coli são da seguinte maneira: Enumere as colônias azuis e azuis esverdeadas com ou sem gás, independente do tamanho ou da intensidade da cor, confirmadas como E. coli . AVISO Não utilize esta placa para a detecção específica de E. coli O157. Devido ao fato de a maior parte das cepas de E. coli O157 serem atípicas - por exemplo, elas são negativas para glucurodinase e não produzem uma cor azul e, assim, elas serão detectadas como coliformes nas Placas 3M Petrifilm REC. 3. Outras colônias de coliformes são vermelhas e bem associadas (dentro do diâmetro de uma colônia) ao gás formado. As colônias não associadas ao gás (distância maior do que uma colônia de diâmetro entre a colônia e a bolha de gás) não contam como coliformes. A contagem total de coliformes consiste tanto das colônias vermelhas com gás quanto das colônias azuis com e sem gás. 4. Faixa de contagem: a. A taxa de contagem para E. coli nas Placas 3M Petrifilm REC é menor ou igual a 100 colônias azuis a azuis esverdeadas, com e sem gás, independente do número total de colônias. b. A taxa de contagem para coliformes nas Placas 3M Petrifilm REC é menor ou igual a 100 colônias. c. A taxa de contagem para E. coli ou coliformes totais pode acontecer em diluições separadas.

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